如何使用HE染色試劑盒對組織切片進行染色?
更新時間:2023-06-19 點擊次數:1247次
HE染色試劑盒是一種用于組織學研究中的常見染色試劑盒,可以將組織切片中的細胞核和胞質染色為藍色和粉紅色,以便觀察和分析組織結構、細胞形態和組織學特征等。其中HE代表HematoxylinandEosin,即血紅木素和伊紅(亦稱為嗜酸性粉紅)兩種染料。
1、制備組織切片
首先需要從動物或人體中取得組織標本,經過固定、脫水、透明化等處理后制備成切片。切片應該保持薄而均勻,通常厚度為4-6微米。
2、蠟片解蠟和再水化
將切片放置在65℃的恒溫箱中15-30分鐘,使其蠟質被溶解。然后使用梯度乙醇和去離子水進行再水化處理,以去除殘留的蠟質并使切片恢復至其原始狀態。
3、染色
將切片依次置于hematoxylin染液、酸性酒紅染液和70%乙醇中浸泡,每個步驟持續時間大約為5-10分鐘。然后將切片置于95%乙醇中漂洗,直至顏色不再流出。最后將切片轉移到100%乙醇中,待其干燥。
4、封片
將切片置于玻片上,使用透明樹脂或類似物質覆蓋并固定切片。最后在覆蓋片上滴上封片劑,以保護樣本并增加顯微鏡下的清晰度。
需要注意的是,在染色過程中要嚴格控制每一步的時間和試劑濃度,以確保染色效果的準確性和穩定性。此外,HE染色試劑盒中的試劑存放應當避免陽光直射和高溫環境,以免影響試劑品質。